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拒絕疏水塌陷,解密AQ柱

更新時間:2024-07-18 點(diǎn)擊次數(shù):457

做色譜分析的小伙伴們都知道,反相色譜(RP-HPLC)是應(yīng)用最為廣泛的一種分離模式,它可以分析從低極性到中高極性的多數(shù)化合物,常用的鍵合相類型有C18、C8和苯基等。然而,反相色譜也有它的一個使用局限性:就是一些大極性化合物在常規(guī)反相中保留較弱,從而無法進(jìn)行后續(xù)的定性與定量分析。

對此我們該采取什么樣的辦法呢?

首先,最容易想到的是通過增加流動相中水相的比例以減弱洗脫強(qiáng)度,從而增加極性化合物的保留。一般來說,分析物的極性越大,流動相中水的比例也需要更高。那么問題來了,對于一些常規(guī)的C18柱在高比例乃至純水相中耐受不好,很容易發(fā)生孔內(nèi)干涸,也就是我們常說的“疏水塌陷"。一旦發(fā)生很容易出現(xiàn)色譜柱保留減弱等問題。

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