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去內(nèi)毒素親和填料的常見(jiàn)問(wèn)題解答

更新時(shí)間:2021-05-27 點(diǎn)擊次數(shù):1216

內(nèi)毒素親和填料

 

內(nèi)毒素是一種常見(jiàn)的蛋白污染物,它的存在使得蛋白的活性研究變得十分復(fù)雜,并且內(nèi)毒素是一種對(duì)人類(lèi)有害的化學(xué)物質(zhì),它能引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性血管內(nèi)凝血等一系列不良癥狀,因此,檢測(cè)和去除蛋白中的內(nèi)毒素有著十分重要的意義。

 

月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 內(nèi)毒素親和填料以自制的瓊脂糖凝膠為基質(zhì)、多占菌素B為配基,用于去除生物源蛋白類(lèi)產(chǎn)品(包括多肽、抗體、多糖等)中的內(nèi)毒素,但多占菌素B只對(duì)部分內(nèi)毒素有抑制作用,而不能抑制所有內(nèi)毒素。

 

技術(shù)參數(shù)

 

常見(jiàn)問(wèn)題解決方案

 

#01 內(nèi)毒素去除效率低,應(yīng)當(dāng)怎么做?

 

①可能原因:樣品pH值不在內(nèi)毒素結(jié)合范圍。

解決方法:用0.1M NaOH或0.1M HCl調(diào)節(jié)pH至7-8。

 

②可能原因:樣品與填料接觸時(shí)間短。

解決方法:降低流速,增加樣品接觸時(shí)間。

 

③可能原因:檢測(cè)系統(tǒng)被內(nèi)毒素污染。

解決方法:確保所有試驗(yàn)用品均為無(wú)熱源產(chǎn)品。

 

④可能原因:內(nèi)毒素與目的蛋白結(jié)合較強(qiáng)

解決方法:優(yōu)化樣品pH,使樣品能夠與內(nèi)毒素分離。

 

#02 樣品被污染,應(yīng)當(dāng)怎么做?

 

①可能原因:該填料純化過(guò)其他樣品。

解決方法:增加接觸時(shí)間;不要用使用過(guò)的填料來(lái)去除不同樣品的內(nèi)毒素。

 

#03 樣品回收率低,應(yīng)當(dāng)怎么做?

 

①可能原因:樣品非特異性吸附在填料上。

解決方法:增加樣品和平衡液中的NaCl濃度。

 

②可能原因:目的蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合一起被去除。

解決方法:優(yōu)化樣品pH,使樣品與內(nèi)毒素分離。

 

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